本发明公开了基于纳米抗体检测氟虫腈残留的ELISA试剂盒及其应用，所述试剂盒包括盒体、设在盒体内的酶标板以及试剂；其中，酶标板的每个孔包被有氟虫腈包被抗原，所述试剂包括抗氟虫腈纳米抗体、氟虫腈标准溶液、酶标记的二抗、缓冲液PBS、洗涤液PBST、底物液、显色液和反应终止液等。检测过程中，酶标板孔壁上吸附的包被抗原和待测氟虫腈相互竞争与抗体反应，通过显色反应观察结果。本发明还提供一条用于构建驼科动物噬菌体展示纳米抗体文库的C端通用PCR引物。本发明的优点是能准确灵敏地检测水、蔬菜中氟虫腈残留，样品的前处理过程简单，耗时少，能同时检测大量的样品，样品检测成本远低于传统的仪器检测方法。
